本文標(biāo)題："顯微鏡計(jì)數(shù)前需要用濾膜將一定體積的細(xì)胞濃縮"
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顯微鏡計(jì)數(shù)前需要用濾膜將一定體積的細(xì)胞濃縮
當(dāng)需計(jì)數(shù)的樣品幾乎不含細(xì)胞或者細(xì)胞濃度非常低時(shí)(如灌裝
流水線上的葡萄酒)，在顯微鏡計(jì)數(shù)前需要用濾膜(<0．45μm)將一
定體積的細(xì)胞濃縮。
1．用9mL稀釋空白液和樣品充分混勻，準(zhǔn)備合適梯度的待測樣
品。
2．將血球計(jì)數(shù)板上的蓋片蓋在計(jì)數(shù)槽上。
3．如果計(jì)數(shù)前需要進(jìn)行細(xì)胞染色，必須將樣品和染色液混合
均勻。記錄體積和特定的稀釋參數(shù)。
4．使用移液管將稀釋或未稀釋的樣品滴1滴于血球計(jì)數(shù)板上每
個(gè)待測表面的輸液槽(V形凹槽)內(nèi)，通過毛細(xì)管滲透作用，蓋片下
的樣品溶液將均勻滲透入計(jì)數(shù)區(qū)域中。或者，將最終稀釋液直接滴
1滴于計(jì)數(shù)方格中，之后蓋上蓋片。盡管這種方法也可行，但蓋蓋
片時(shí)要非常小心，避免在計(jì)數(shù)區(qū)域內(nèi)出現(xiàn)氣泡。另外，溶液未充滿
計(jì)數(shù)方格或者溢出計(jì)數(shù)槽都是不行的。
5．使用顯微鏡時(shí)，可以選擇40×或100×的物鏡放大倍數(shù)，統(tǒng)
計(jì)足夠量的方格中的細(xì)胞數(shù)，使細(xì)胞總數(shù)約600個(gè)。分別統(tǒng)計(jì)血球
計(jì)數(shù)板上的2個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)域的細(xì)胞數(shù)，再相加取平均值。
6．計(jì)算公式：原始樣品菌數(shù)(細(xì)胞個(gè)數(shù)／mL)=計(jì)數(shù)區(qū)域內(nèi)的平
均細(xì)胞數(shù)×用于計(jì)數(shù)的溶液體積×稀釋倍數(shù)
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